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簡要描述:熒光素酶報告基因?qū)嶒炇且环N常用的生物學(xué)實驗技術(shù),用于研究基因調(diào)控和蛋白質(zhì)相互作用以及藥物篩選等領(lǐng)域。
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熒光素酶報告基因
產(chǎn)品介紹
熒光素酶報告基因實驗是一種常用的生物學(xué)實驗技術(shù),用于研究基因調(diào)控和蛋白質(zhì)相互作用以及藥物篩選等領(lǐng)域。實驗的基本步驟包括選擇熒光素酶報道基因、將報告基因克隆到質(zhì)粒中、將質(zhì)粒導(dǎo)入到細胞中、加入底物熒光素并檢測熒光值高低來判斷不同處理組對該轉(zhuǎn)錄調(diào)控原件的影響。熒光素酶報告實驗原理被廣泛應(yīng)用于基因表達調(diào)控、蛋白質(zhì)相互作用、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等領(lǐng)域。熒光素酶報告實驗可以驗證microRNA同mRNA靶向互作。
轉(zhuǎn)錄因子的 DNA 結(jié)合域和順式作用元件實現(xiàn)共價結(jié)合,從而對基因的表達起抑制或增強的調(diào)控作用。
熒光素酶(Luciferase):是能夠催化底物氧化發(fā)光的一類酶的統(tǒng)稱
熒光素酶的種類很多,其中應(yīng)用較為廣泛的是螢火蟲熒光素酶(Firefly luciferase,F(xiàn)LUC)和海腎熒光素酶(Renilla luciferase,RLUC)
實驗原理
將靶啟動子片段插入熒光素酶表達序列前方的報告基因質(zhì)粒,然后共轉(zhuǎn)染細胞
實驗結(jié)果
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