引言

高架十字迷宮測(cè)試最初是為了檢測(cè)嚙齒動(dòng)物的情緒反應(yīng)而建立的。整個(gè)裝置通常位于離地面500毫米的高度，由兩個(gè)開(kāi)放的和兩個(gè)封閉的臂組成一個(gè)十字形。在觀察期間，記錄動(dòng)物在每個(gè)臂上的探索行為（包括持續(xù)時(shí)間和進(jìn)入次數(shù)）、行走距離，以及特定行為，如實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的頭部探索行為。通過(guò)這些測(cè)量，動(dòng)物的焦慮程度作為實(shí)驗(yàn)結(jié)果被估計(jì)。以下是一份高架十字 迷宮的實(shí)驗(yàn)協(xié)議。

一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

所有實(shí)驗(yàn)程序均需獲得實(shí)驗(yàn)所在區(qū)域動(dòng)物護(hù)理和使用委員會(huì)的批準(zhǔn)。

從實(shí)驗(yàn)動(dòng)物公司購(gòu)買(mǎi)小鼠。

實(shí)驗(yàn)行為開(kāi)始前至少一周，以每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)小鼠籠4只動(dòng)物的小組形式飼養(yǎng)，并鋪設(shè)紙墊料。

動(dòng)物房間保持標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境條件，包括光照（12:12光/暗周期，燈光在10:00點(diǎn)開(kāi)啟）、室溫（25.0 ± 0.5°C）、濕度（55 ± 10%）和通風(fēng)（每小時(shí)10次）。

動(dòng)物可自由取食和水。

二、實(shí)驗(yàn)設(shè)備

VisuTrack動(dòng)物行為學(xué)分析軟件

搭建好十字形鋁型材框架，并安放十字迷宮宮體。十字迷宮宮體包括兩個(gè)開(kāi)放通道（35厘米×5厘米）和兩個(gè)相同尺寸的封閉通道，通道高度為10厘米，中央?yún)^(qū)域（5厘米×5厘米）連接四個(gè)臂。為了防止小鼠從開(kāi)放通道上掉下來(lái)，開(kāi)放臂兩端設(shè)置了一條突出的邊緣（3毫米厚，3毫米高）。

宮體由白色亞克力板組成，并配置黑色底板以便分析小白鼠。閉臂墻壁默認(rèn)為不透明乳白色的墻壁（也有一些閉臂是透明的，但會(huì)對(duì)小鼠焦慮水平的檢測(cè)產(chǎn)生影響，后續(xù)會(huì)撰文說(shuō)明），宮體距地面不低于550毫米且高度可調(diào)。

在容器頂部設(shè)置照明，以照亮迷宮表面到所需的光強(qiáng)度。

在十字迷宮支架中央上安裝數(shù)字視頻攝像機(jī)，以實(shí)時(shí)視頻監(jiān)控行為測(cè)試。

三、實(shí)驗(yàn)流程

1.每天在固定的時(shí)間段測(cè)試1小鼠，以避免可能受晝夜變化影響的血漿皮質(zhì)的醇水平。

2.調(diào)整每個(gè)臂部遠(yuǎn)端和中心平臺(tái)表面的光照強(qiáng)度至約100勒克斯。

3.在每次測(cè)試前，用70%乙醇溶液清潔整個(gè)裝置，并用蒸餾水擦拭。

4.點(diǎn)擊VisuTrack軟件上的“開(kāi)始播放"按鈕，啟動(dòng)將記錄小鼠行為的攝像機(jī)，并把測(cè)試時(shí)間設(shè)置為5分鐘。

5.將一只動(dòng)物放置在面向開(kāi)放臂的中心平臺(tái)上，并在軟件中點(diǎn)“開(kāi)始分析"，允許小鼠在高架十字 迷宮里自由探索，點(diǎn)擊“開(kāi)始分析后"軟件5分鐘自動(dòng)停止分析，并自動(dòng)生成老鼠的運(yùn)動(dòng)軌跡圖和運(yùn)動(dòng)數(shù)據(jù)。

6.將測(cè)試過(guò)的動(dòng)物送回飼養(yǎng)后，手動(dòng)計(jì)算糞便和尿液的數(shù)量，這是因?yàn)樾∈笈判刮锟梢詡?cè)面的反映出老鼠的焦慮水平。

7.重復(fù)步驟3-6重復(fù)至所有小鼠實(shí)驗(yàn)結(jié)束。

四、測(cè)試指標(biāo)

高架十字 迷宮測(cè)試主要衡量以下幾個(gè)參數(shù)，這些參數(shù)可以被用來(lái)評(píng)估動(dòng)物的焦慮水平和探索行為：

開(kāi)放臂進(jìn)入次數(shù)：這個(gè)參數(shù)衡量的是動(dòng)物進(jìn)入開(kāi)放臂的頻次。動(dòng)物越愿意進(jìn)入開(kāi)放的臂，表明其焦慮程度越低。

封閉臂進(jìn)入次數(shù)：這個(gè)參數(shù)衡量的是動(dòng)物進(jìn)入封閉臂的頻次。動(dòng)物更傾向于進(jìn)入封閉的臂，可能表明其焦慮程度較高。

開(kāi)放臂停留時(shí)間：這個(gè)參數(shù)衡量的是動(dòng)物在開(kāi)放臂的停留時(shí)間。在開(kāi)放臂停留的時(shí)間越長(zhǎng)，表明動(dòng)物的焦慮程度越低。

封閉臂停留時(shí)間：這個(gè)參數(shù)衡量的是動(dòng)物在封閉臂的停留時(shí)間。在封閉臂停留的時(shí)間越長(zhǎng)，可能表明動(dòng)物的焦慮程度較高。

總探索時(shí)間：這個(gè)參數(shù)衡量的是動(dòng)物在迷宮中的總探索時(shí)間。這可以用來(lái)評(píng)估動(dòng)物的活躍度和探索行為。

下面是一些常用的公式，用于從高架十字迷宮測(cè)試中獲取有意義的數(shù)據(jù)：

開(kāi)放臂進(jìn)入的百分比：(開(kāi)放臂進(jìn)入次數(shù) / 總進(jìn)入次數(shù)) * 100%

封閉臂進(jìn)入的百分比：(封閉臂進(jìn)入次數(shù) / 總進(jìn)入次數(shù)) * 100%

開(kāi)放臂停留的百分比：(開(kāi)放臂停留時(shí)間 / 總探索時(shí)間) * 100%

封閉臂停留的百分比：(封閉臂停留時(shí)間 / 總探索時(shí)間) * 100%