1)收貨前根據(jù)說明書培養(yǎng)條件,提前準(zhǔn)備細(xì)胞培養(yǎng)所需材料。
2)收到細(xì)胞后,請檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。
3)收貨后沒有外觀損壞的情況下用75%酒精消毒后將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h等待細(xì)胞穩(wěn)定。
4)細(xì)胞穩(wěn)定后在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),判斷細(xì)胞的密度并清晰拍照200倍400倍照片最少2張記錄反饋細(xì)胞狀態(tài)以防出現(xiàn)售后作為證據(jù),沒有照片和反饋默認(rèn)接受細(xì)胞質(zhì)量沒有問題。
5)貼壁細(xì)胞:在運輸過程中由于運輸顛簸貼壁細(xì)胞會有脫落的現(xiàn)象,如發(fā)現(xiàn)有脫落或者脫落后抱團生長,可將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和未貼壁細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶或者培養(yǎng)皿中,按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件加入新配制的完全培養(yǎng)基。
6)懸浮細(xì)胞:T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中(加入按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基)。
注意事項:
A.傳代比例:
1個T25瓶傳2個6cm的培養(yǎng)皿或者2個T25瓶相當(dāng)于1:2
1個T25瓶傳1個10cm的培養(yǎng)皿或者1個T75瓶相當(dāng)于1:3
B.由于原代細(xì)胞的傳代次數(shù)和活性是有限的,因此收到細(xì)胞后需要規(guī)劃培養(yǎng)傳代和做實驗時間點,以防出現(xiàn)原代細(xì)胞本身壽命已達最大限度時候才開始做實驗,因為這個時候的原代細(xì)胞很可能增值能力,形態(tài),狀態(tài)都已經(jīng)不是很好了,所以最好提前做好預(yù)估判斷。
原代細(xì)胞發(fā)貨建議常溫活細(xì)胞發(fā)貨狀態(tài)更加穩(wěn)定。我們發(fā)貨的原代細(xì)胞T25瓶包裝,細(xì)胞密度一般在80%上下,充液為常規(guī)培養(yǎng)完全培養(yǎng)基,客戶可根據(jù)自己的實驗方案決定是否需要收集起來繼續(xù)使用3-4天還是抽掉丟棄。